源： 酵母來源
純度：>98% SDS-PAGE
內(nèi)毒素水平：N/O
分子量：28.93kDa

活性測定

可以使用血紅蛋白作為底物來測量蛋白酶 K 活性

描述

蛋白酶 K 是一種蛋白酶，屬于肽酶家族 S8。該酶已廣泛表現(xiàn)出底物特異性，并在天然狀態(tài)下降解許多蛋白質(zhì)。蛋白酶 K 被蛋白酶抑制劑（如苯    ）抑制。這種酶活性不受巰基修飾試劑的影響。它在 EDTA 緩沖液中穩(wěn)定。

重構

打開前短暫離心樣品瓶。建議在含有 0.1% 無內(nèi)毒素重組人血清白蛋白的無菌 PBS 中重構蛋白質(zhì)。

穩(wěn)定性與儲存

使用手動除霜冰箱，避免反復凍融循環(huán)。一般情況下：自收貨之日起 12 個月，供貨溫度為 -20 至 -80°C。1 個月，復溶后在無菌條件下 2 至 8°C。3 個月，重構后在無菌條件下 -20 至 -80°C。

蛋白酶 K 儲備液 - 20 mg/ml （下載 PDF 格式）

指示

1） Tris-CaCl2緩沖液 PH8.0（200 mM Tris PH8.0 + 3 mM CaCl2)

1. 量取 5 ml 不含 RNase 的 200mM Tris 緩沖液 （pH 8.0）。

2. 添加 1.66 毫克（3 mM）氯化鈣 （CaCl2） 添加到 Tris Buffer 并溶解。

2） 5ml 儲備液 （20mg/ml）

1. 測量 2.5 ml Tris-CaCl2將緩沖液 （pH 8.0） 放入離心管中。

2. 添加 100 mg 蛋白酶 K （YPK-K-100GM）。

3. 輕輕混勻以溶解蛋白酶 K。

4. 用 0.22 μm 過濾器對溶液進行消毒。

5. 用 100% 甘油填充至 5 ml 的最終體積（添加 2.5 ml 甘油）。

6. 混合直至溶解。

在 -20°C 下分裝儲存 1 年。

3） 建議工作濃度：0.05~1mg/ml

注意：蛋白酶 K 與核酸酶相互作用。為確保最大的蛋白酶 K 活性，請使用經(jīng) 0.1% DEPC 處理的水