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產(chǎn)品中心細(xì)胞培養(yǎng)NK細(xì)胞培養(yǎng)套裝AS-26同立海源AMMS®高純度NK試劑盒套裝2.0
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品分類(lèi)
同立海源AMMS®高純度NK試劑盒套裝2.0（AMMS®High Purity NK Cell Culture Kit 2.0）
產(chǎn)品貨號(hào)：AS-26
同立海源AMMS®高純度NK試劑盒套裝2.0
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品適用于新鮮外周血經(jīng)高純度NK添加因子分離獲得的PBMC，經(jīng)體外活化擴(kuò)增獲得CD3-CD56+比例＞95%的NK細(xì)胞。僅限體外研究使用。
高純度NK試劑盒套裝2.0 產(chǎn)品特點(diǎn)
1、操作簡(jiǎn)單：在分血過(guò)程中20分鐘完成CD3-的PBMC的富集；
2、外周血NK純度達(dá)95%以上。
高純度NK試劑盒套裝2.0 套裝組成
注意事項(xiàng)
1.血樣要求：
①外周血 PBMC需2.5×107cells（推薦采血量50mL左右，用肝su鈉真空采xue管）,建議采血后 4 小時(shí)內(nèi)操作，建議做淋巴細(xì)胞亞群分析。不建議使用凍存的外周血。
2.種瓶密度：PBMC 鋪瓶的起始細(xì)胞密度建議1×106個(gè)/mL，樣本狀態(tài)差可適當(dāng)提高鋪瓶密度至2×106 個(gè)/mL。
3.補(bǔ)液密度：補(bǔ)液前密度一般在 1.5~2×106 個(gè)/mL；補(bǔ)液后密度一般在0.6~1×106 個(gè)/mL ，不可低于 0.6×106 個(gè) /mL。
4.培養(yǎng)基的使用：
① 每次補(bǔ)液前需要將培養(yǎng)基在室溫下自然復(fù)溫。
② 禁止將整瓶培養(yǎng)基放入 37℃孵箱復(fù)溫，否則會(huì)加速補(bǔ)液培養(yǎng)基中細(xì)胞因子的失活。
③ 配置好的擴(kuò)增培養(yǎng)基（含 IL-2）時(shí)效較短，建議一周左右使用完，尤其是活化前期（前 7 天）。
5.正確處理和保存血漿：具體見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。離心后的血漿要確保澄清。
6 .培養(yǎng)袋的使用：培養(yǎng)體積小于 1L 的時(shí)候，需要折疊培養(yǎng)袋再進(jìn)行放置。建議使用我司推薦型號(hào)。
7 .靈活掌握補(bǔ)液時(shí)機(jī)：細(xì)胞擴(kuò)增狀態(tài)不理想時(shí)，可推遲補(bǔ)液時(shí)間，但是盡量不要調(diào)整補(bǔ)液的體積尤其注意第一 次補(bǔ)液的時(shí)機(jī)。 裝袋后的補(bǔ)液體積可根據(jù)培養(yǎng)時(shí)間的情況進(jìn)行調(diào)整。
8 .控制細(xì)胞結(jié)團(tuán)：細(xì)胞裝袋前，需要根據(jù)克隆團(tuán)的情況充分拍散細(xì)胞。裝袋后也需每天對(duì)袋子進(jìn)行拍打，揉搓 肉眼觀察較大的細(xì)胞團(tuán)。
9 .包被時(shí)間：A 因子包被后需 4℃平放過(guò)夜。（緊急情況下可嘗試 37℃包被2小時(shí)）
10. 培養(yǎng)初期不要隨意晃動(dòng)培養(yǎng)瓶：否則活化的克隆團(tuán)容易飄起來(lái)，而降低包被因子對(duì)細(xì)胞團(tuán)的活化。
11.因子的使用：為減少因子掛壁的損失，建議使用前進(jìn)行離心處理，將含因子的西林瓶放入50mL離心管中，1000rpm離心1-2min。
12.設(shè)備保養(yǎng)：定期檢查 CO2 培養(yǎng)箱溫度、濃度并及時(shí)更換濾網(wǎng)。定期保養(yǎng)和清潔生物安全柜。
13.環(huán)境監(jiān)測(cè)：定期更換初效、中效、高效過(guò)濾器，保證潔凈區(qū)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。
14 .固定實(shí)驗(yàn)耗材種類(lèi)和型號(hào)：需提前評(píng)估變更型號(hào)、規(guī)格對(duì)培養(yǎng)效果的影響，如175cm2的培養(yǎng)瓶，細(xì)胞培養(yǎng)袋等。
15.PBMC 的收集：因分血過(guò)程中白膜層僅收集了CD3-的淋巴細(xì)胞，收獲的PBMC細(xì)胞量會(huì)比未添加高純度NK因子的細(xì)胞數(shù)少1/3-1/2。
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